jurnal 5

Bioavailability and antioxidant activity of tea flavanols after
consumption of green tea, black tea, or a green tea extract
supplement1–3

Susanne M Henning, Yantao Niu, Nicolas H Lee, Gail D Thames, Rosario R Minutti, Hejing Wang, Vay Liang W Go,
and David Heber

Bioavailabilitas dan aktivitas antioksidan flavanol teh setelahkonsumsi teh hijau, teh hitam, atau ekstrak teh hijausupplement1-3
Hijau dan hitam polifenol teh telah secara ekstensif dipelajari sebagai agen kemopreventif kanker. Banyak in vitro percobaan telah mendukung aktivitas antioksidan yang kuat mereka. Tambahanin vivo studi diperlukan untuk menguji farmakokinetik hubungan penyerapan dan aktivitas antioksidan polifenol teh diberikan dalam bentuk teh hijau atau hitam atau suplemen ekstrak teh. Tujuan: Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membandingkan farmakokinetik disposisi polifenol teh dan efeknya pada antioksidan kapasitas dalam plasma 8 jam setelah konsumsi bolus baik teh hijau, teh hitam, atau teh ekstrak suplemen hijau. Desain: Tiga puluh subyek sehat secara acak ditugaskan untuk 3 berbedaurutan teh hijau, teh hitam, atau teh hijau ekstrak suplemen dalam 3? 3 desain crossover dengan periode washout 1-minggu di antara perawatan. Hasil: penyerapan flavanol itu ditingkatkan ketika polifenol tehdiberikan sebagai suplemen teh hijau dalam bentuk kapsul dan memimpin peningkatan kecil tapi signifikan dalam aktivitas antioksidan plasma dibandingkan dengan ketika polifenol teh dikonsumsi sebagai teh hitam atau teh hijau. Semua 3 intervensi diberikan jumlah yang sama (?) -epigallocatechin-3-gallate. Kesimpulan: Pengamatan kami menunjukkan bahwa teh hijau suplemen ekstrak mempertahankan efek menguntungkan dari teh hijau dan hitam dan mungkindigunakan dalam penelitian kemoprevensi masa depan untuk memberikan dosis besarpolifenol teh tanpa efek samping kafein terkait dengan hijau dan hitam minuman teh. Am J Clin Nutr 2004; 80:1558-1564.KATA KUNCI Bioavailabilitas, farmakokinetik, teh hitam,teh hijau, kapasitas antioksidan, teh flavanols, antioksidan setara troloxkapasitasPENDAHULUANTeh hijau (GT) dan teh hitam (BT) keduanya berasal dariteh daun Camellia sinensis. GT diproduksi dengan pengeringandaun C. sinensis. Pembuatan BT membutuhkantambahan langkah fermentasi, yang menghasilkan theaflavin danthearubigins (1). Theaflavin dan thearubigins yang oligomersenyawa polifenol disintesis dari monomer flavanol tehunit (Gambar 1). Flavanols Teh dianggap sebagai biologisKonstituen aktif teh (2). Para flavanols utama yang ditemukan dalamGT, dan pada tingkat lebih rendah di BT, adalah (?)-Epigallocatechin-3-gallate (EGCG), (?)-epigallocatechin (EGC), (?)-epicatechin-3-gallate (ECG), dan (?)-Epikatekin (EC). EGCG yang paling adalahberlimpah dan banyak dipelajari polifenol teh (2). EGCGandECGmemiliki tertinggi aktivitas scavenging radikal (3). Karenapopularitas di seluruh dunia teh dan karena tidak adanya toksisitassebagai agen makanan alami, teh merupakan kandidat yang sangat baik untukpencegahan kanker diet (4). DecaffeinatedGTsupplements adalahtersedia untuk memberikan dosis besar polifenol tanpa diinginkanefek samping kafein. Kafein, bagaimanapun, mungkin berkontribusidengan efek anti kanker teh, seperti yang ditunjukkan dalam beberapamodel hewan (5). Studi dalam baris sel dan model hewan memilikijelas menunjukkan bahwa flavanol teh memiliki antiproliferatif, antiangiogenic,dan kegiatan anti kanker (6). Namun demikian, upayamenerjemahkan in vitro dan studi hewan untuk intervensi manusia memilikibertemu dengan keberhasilan yang terbatas (7). Mereka terhambat sebagian olehsifat yang artifisial dari penelitian in vitro, yang meliputi pemaparansel untuk konsentrasi supraphysiologic katekin teh dankurangnya informasi tentang bioavailabilitas flavanol teh. Terbatasdata pada bioavailabilitas hijau dan BT flavanols darihijau dan BT padatan atau suplemen ekstrak GT (GTS) tersediadari laboratorium terpisah (8, 9) namun belum diselidikipada peserta penelitian yang sama di bawah kondisi menyediakanjumlah yang sama dari EGCG.In vitro antioksidan potensial berbeda teh dan tehflavanols telah dievaluasi secara ekstensif (3, 10). Data dari dalamvivo menyelidiki aktivitas antioksidan teh menunjukkanhasil yang beragam tergantung pada metode yang diterapkan dan desain studi(11, 12). Sebagian besar penelitian yang baik jangka panjang (3 minggu) ataujangka pendek (sampai dengan 3 jam) dan dilakukan pada peserta puasaSUBYEK DAN METODEStudi desainTiga puluh subyek sehat (14 pria dan 16 wanita) antara 20dan 39 y usia direkrut. Subyek diminta untuk berpantangdari mengkonsumsi teh, produk teh yang terkait, vitamin, mineral,dan suplemen makanan atau herbal selama periode penelitian.Peminum teh berat dan pengguna terapi hormon atau antibiotikdikeluarkan. Semua subjek disaring dengan medis lengkapsejarah dan menandatangani informed consent form.Arandomized3? 3 desain crossover dengan periode washout 1-wk digunakan untukstudi intervensi. Subyek secara acak ditugaskan untuk 3urutan yang berbeda dari GT, BT, atau GTS di UniversitasCalifornia, Los Angeles (UCLA), Clinical Research UmumPusat (GCRC). Peserta tiba puasa dan diberikandengan sarapan rendah flavonoid. Setelah sarapan, darah dasarsampel diambil, dan subyek diberi 30 menit untukmengkonsumsi teh atau suplemen teh. Subyek diizinkan terbatasasupan air dan dilengkapi dengan-flavonoid rendahmakan siang dan makan malam. Darah dikumpulkan 1, 2, 4, 6, dan 8 jam setelahteh atau konsumsi kapsul teh. Protokol ini disetujui olehInstitutional Review Board untuk Perlindungan Subyek Manusiadi Research di UCLA.Kimia dan pelarutEGCG, EGC, EC, EKG,?-D-glukuronidase tipe XA dariEscherichia coli, jenis arylsulfatase VIII dari isi perut abalone,2,2 ¡¯-azinobis-(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonat) diamoniumgaram (ABTS), mangan dioksida, dan 6-hidroksi-2, 5,7,8 -Asam tetrametilkroman-2-karboksilat (Trolox) dibelidari Sigma-Aldrich (St Louis). Teh hijau (Paman Lee Tea, ElMonte, CA) dan BT tas (Bigelow Darjeeling Blend; RC BigelowInc, Fairfield, CT) dari satu lot produksi adalah murah hatidisediakan oleh masing-masing perusahaan teh. GTS disumbangkan oleh Pharmanex(Provo, UT). Asetonitril HPLC-grade, asam sitrat, dan amoniumasetat yang dibeli dari Fisher Scientific (Pittsburgh).Persiapan TehFlavanol teh, theaflavin, dan kafein konsentrasi yangdiukur dalam minuman teh, yang disiapkan dalam yang samarupa dalam studi sebelumnya yang menggunakan analisis HPLC (3). Untukstudi intervensi, panas BT dan GT disiapkan oleh staf terlatihdi theUCLAGCRC. Empat tas ofBTor 3 tas ofGTwere ditambahkanuntuk 426mLboiling air dan direndam selama 5 menit. Jumlah tehtas dipilih untuk mencocokkan isi EGCG. Teh disajikansegera dengan atau tanpa gula atau susu 45 mL.Pengambilan sampel dan penyimpananSampel darah dikumpulkan segera setelah setiapmenggambar di UCLA GCRC dan diangkut ke Pusat UCLAfor Human Nutrition di atas es untuk pengolahan dan penyimpanan. Kencingvolume diukur dan dicatat. Darah di EDTA vakumtabung disentrifugasi pada suhu 4 ° C pada 2060? g selama 10 menit denganGS-6R centrifuge (Beckman Instruments, Palo Alto, CA);0,8 mL aliquot plasma disimpan pada? 70 ° C tanpa suplemenatau dengan 80? L dari 20% askorbat asam 0,1% EDTAsolution(0,4 mmol / L NaH2PO4, pH 3.6).Analisis flavanol dalam plasma dan urinSebuah modifikasi metode oleh Lee et al (13) digunakan.Secara singkat, 200? L plasma atau urine dicampur dengan 12? L dari 10%asam askorbat: 40 mmol / L NaH2PO4: 0,1% EDTA, 20 L 50?mmol natrium fosfat / L (pH 7,4), 20? Lof 2.3? mol katekingallate / L sebagai standar internal 500 unit?-D-glukuronidaseJenis XA dari Escherichia coli (Sigma Chemical Co, St Louis),dan 4 unit jenis sulfatase VIII dari isi perut abalone (SigmaChemical Co). Campuran diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 45 menit.Untuk ekstraksi plasma reaksi dihentikan dengan penambahanHASILProfil farmakokinetik plasma flavanol tehSetelah konsumsi bolus GT, BT, atau GTS, konsentrasitotal (unconjugated, sulfat, dan glucuronidated) Tehflavanols dihitung dengan HPLC dengan coulometri berbagai elektrokimiadeteksi. Para flavanols utama teh terdeteksi dalamplasma EGC, EC, EGCG, dan EKG. Metode ekstraksimenunjukkan pemulihan dari 90-109%.Kandungan flavanol, asam galat, jumlah theaflavin, dan kafeindari produk teh 3 digunakan dalam intervensi ditunjukkan dalamTabel 1. Standarisasi theEGCGcontent dalam persiapan tehmempengaruhi isi flavanol teh lainnya. Teh hijau mengandung2,5 dan 11 kali jumlah EGC daripada BT dan GTS,masing-masing, dan BT mengandung 4 kali dari EGC daripada GTS(Tabel 1). Isi EC tidak berbeda antara BT danGTS, whereasGTcontained dua kali muchECthanBTand GTS.Tidak ada perbedaan di antara EKG GT, BT, dan GTS.Parameter farmakokinetik dirangkum dalam Tabel 2.Persiapan GT memberikan dosis tertinggi EGC dan EC.Cmax dan AUC nilai untuk konsentrasi EGC plasma secara signifikanlebih tinggi setelah konsumsi GT daripada setelah BT dan GTSkonsumsi. Selain itu, plasma EC Cmax secara signifikanlebih tinggi setelah konsumsi GT daripada setelah BT dan konsumsi GTS.BT mengandung 4 kali lebih banyak dibandingkan dengan GTS EGC,tapi Cmaks plasma dan AUC hanya dua kali konsentrasisetelah konsumsi BT daripada setelah konsumsi GTS (Tabel 2).Meskipun tidak ada perbedaan dalam konsumsi EC, GTSmenunjukkan Cmaks tinggi dan nilai AUC (P? 0,0001) untuk plasmaEC dibandingkan dengan BT (Tabel 2). Kecenderungan yang sama juga terlihatuntuk EGCG dan ECG. Konsumsi GTS menghasilkan 60%dan 100% peningkatan Cmax EGCG dibandingkan dengan GT danIntervensi BT, masing-masing, dan 90% dan 123% peningkatanCmaks EKG yang dibandingkan dengan GT dan BT, masing-masing (Tabel 2).Hasil ini sangat menyarankan bahwa ketika jumlah yang sama tehflavanols diberikan dalam bentuk teh diseduh atau sebagai GTS,PEMBAHASANTujuan utama dari penelitian ini adalah untuk membandingkan farmakokinetikdan efek pada aktivitas antioksidan plasma flavanol tehsetelah konsumsi bolus BT, GT, atau GTS. Penelitiandilakukan dengan menggunakan GT, BT, dan GTS cocok untukisi EGCG mereka. GT dan GTS umumnya mengandung lebih tinggijumlah EGCG dari BTS (3). Namun, Darjeeling danCeylon bts mengandung jumlah yang sangat tinggi dari EGCG (16). Dipenelitian ini, kami menggunakan Blend Darjeeling BT untuk mencocokkanisi EGCG dari GT dan GTS. Teh ini, bagaimanapun, jugamengandung sejumlah khas total theaflavin harus diklasifikasikansebagai BT.Konsentrasi flavanol plasma maksimum ditentukanpenelitian ini baik dibandingkan dengan data yang dihasilkan oleh peneliti lain(8). Mengkonfirmasi studi sebelumnya, kami juga mendeteksi lebih rendahbioavailabilitas plasma EGCG daripada EGC dan EC (8). Selanjutnya,kami mampu mendeteksi dan mengukur konsentrasi plasmaEKG. Upaya awal kami untuk mengidentifikasi EKG dalam plasmaterhalang oleh konsentrasi plasma yang rendah, yangbertopeng dengan mengganggu puncak di voltagram dari elektrokimiadetektor. Namun, metode kami dioptimalkan untuk memisahkanEKG puncak. EKG puncak telah diverifikasi oleh perbandingan denganEKG standar dengan menggunakan kromatografi cair / elektrosprayionisasi spektrometer massa (data tidak ditampilkan). Ketikadosis yang sama dari flavanols diberikan melalui GT, BT, atauGTS, GTS menghasilkan peningkatan signifikan lebih besar pada Cmaxdan nilai-nilai AUC. tmax selalu diperpanjang oleh? 1 jam untuk semua 4flavanols setelah konsumsi GTS dibandingkan dengan setelah GT danKonsumsi BT. Selain itu, persentase EGC dan ECintake diekskresikan dalam urin meningkat signifikan setelah GTSkonsumsi daripada setelah GT dan konsumsi BT. Hasil inisangat menyarankan bahwa penyerapan polifenol dari GTS,disampaikan dalam kapsul gelatin standar, ditunda tetapilebih tinggi daripada setelah GT atau administrasi BT. Hal ini dapat mendalilkanbahwa GTS meningkatkan bioavailabilitas flavanol teh difase penyerapan. Studi lebih lanjut diperlukan untuk memahami hal inifenomena.Setelah konsumsi GTS, AUC aktivitas antioksidan plasmalebih dari 8 jam secara signifikan meningkat dengan jumlah yang kecil(2-3%) dibandingkan dengan setelah GT dan konsumsi BT ketikaditentukan traditionalTEACassay tersebut. In vitro spikingsampel plasma dikumpulkan menunjukkan bahwa konsentrasi polifenol plasma7,5? mol / L itu diperlukan untuk menyebabkan peningkatanaktivitas antioksidan. Rata-rata konsentrasi plasma maksimaltotal flavanols adalah 1,2? mol / L.? Ini menunjukkan bahwapeningkatan konsentrasi flavanol plasma tidak cukup tinggi untukmenyebabkan peningkatan kapasitas antioksidan. Ini peningkatan kecildalam aktivitas antioksidan plasma mungkin disebabkan karena metabolit flavanolatau produk degradasi. Meng et al (17) telah menunjukkan bahwa tehkatekin dimetabolisme untuk produk cincin-fisi (valerolactones)dan catechin alkohol. Produk-produk cincin fisi dapatjuga lebih lanjut dimetabolisme di usus menjadi asam fenolik sederhanaseperti asam 4-hidroksibenzoat, asam 3,4-Dihydroxybenzoic,Asam 3-metoksi-4-hydroxyhippuric, dan asam vanilat, yangtelah terdeteksi dalam urin manusia setelah konsumsi teh (18).Beberapa asam fenolat menunjukkan cukup antioksidan in vitrokegiatan (data tidak dipublikasikan). Selain dimerisasi EGCGdapat meningkatkan kapasitas antioksidan, karena telah terbuktibahwa dimerisasi EGCG pada pH basa akan menyebabkan baruproduk dimerisasi (theasinensin A dan D) dengan antioksidanKegiatan 2-3-kali lipat dari EGCG (19).Kami menyimpulkan bahwa polifenol diberikan dalam bentukGTS menunjukkan peningkatan bioavailabilitas dibandingkan dengan GTatau BT, yang menyebabkan peningkatan kecil tapi signifikan antioksidankapasitas. Pembentukan metabolit flavanol mungkin telah berkontribusi terhadapefek antioksidan karena kurangnya korelasi antara konsentrasi flavanol plasma dan nilai-nilai TE; zat iniperlu dipelajari lebih lanjut (Andini Maarisyah Putri)